[摘要] 本文綜述針刺對**神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)與功能的影響。針刺**腦癱能有效改善其運(yùn)動(dòng)功能和學(xué)習(xí)記憶能力，作用機(jī)制非常復(fù)雜，涉及腦血流量、病理形態(tài)學(xué)、能量代謝、自由基代謝、細(xì)胞凋亡、突觸聯(lián)系、神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)等方面。

[關(guān)鍵詞] 腦性癱瘓；針刺；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；綜述

腦癱是自受孕開始至嬰兒期非進(jìn)行性腦損傷和發(fā)育缺陷所導(dǎo)致的綜合征，主要表現(xiàn)為運(yùn)動(dòng)障礙及姿勢異常，可并發(fā)智力障礙、癲癇、感知覺障礙、交流障礙、行為異常及其他異常。腦癱是一種常見的兒科疾患，屬于中醫(yī)“痿證”“五軟”“五遲”“五硬”“癡呆”等病癥范疇。腦癱后的功能障礙不同程度地影響其獨(dú)立生存能力、生活質(zhì)量和未來的職業(yè)能力，給家庭、社會造成不同程度的負(fù)擔(dān)。針刺作為中國傳統(tǒng)康復(fù)**手段之一，是腦癱**的常用方法，有效、經(jīng)濟(jì)、**反應(yīng)少。目前，很多學(xué)者借助現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，不斷探索著可能的療效及其機(jī)制，其中腦癱建模常常以缺血缺氧性腦損傷為主。本文主要綜述 2003 年以來國內(nèi)外有關(guān)針刺**腦癱動(dòng)物的研究，為針刺療法在腦癱中更合理地應(yīng)用及相關(guān)深入研究提供參考。針刺**腦性癱瘓動(dòng)物懸尾實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

1 對運(yùn)動(dòng)功能和學(xué)習(xí)記憶能力的影響

腦缺血缺氧或?qū)m內(nèi)感染致腦損傷幼鼠站立不穩(wěn)，多種運(yùn)動(dòng)功能評估包括觸覺刺激試驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)、斜坡實(shí)驗(yàn)、Morris 水迷宮和 Y 迷宮測試等，顯示其神經(jīng)功能明顯下降，隨著針刺時(shí)程增加，神經(jīng)功能改善明顯，協(xié)調(diào)性增強(qiáng)，早期介入或結(jié)合其他療法后效果更佳。總之針刺**，尤其是早期介入或聯(lián)合其他療法的應(yīng)用，可顯著促進(jìn)缺血缺氧性腦癱幼鼠運(yùn)動(dòng)功能和學(xué)習(xí)記憶能力的改善。

2 對腦血流量的影響

幼鼠腦缺血缺氧后腦部血流量顯著下降，腦缺血缺氧后2~4 d 血流量升高，仍低于正常血流量，腦組織水腫加重，至第 4天恢復(fù)正常。應(yīng)用激光多普勒血流測定儀測定，發(fā)現(xiàn)經(jīng)針刺**后其血流量較基礎(chǔ)狀態(tài)明顯升高，運(yùn)動(dòng)功能改善，2周后腦血流增長率較**針刺后有所下降，針刺同時(shí)也能減輕腦組織水腫，證明針刺能有效改善缺血缺氧性腦癱幼鼠大腦微循環(huán)。

3 對病理形態(tài)學(xué)的影響

幼鼠腦缺血缺氧后部分細(xì)胞變性、壞死，出現(xiàn)典型的凋亡，胞漿中作為神經(jīng)細(xì)胞機(jī)能狀態(tài)標(biāo)志的尼氏體大量減少甚至消失，樹突減少或消失，血管閉塞，腦軟化灶形成，小膠質(zhì)細(xì)胞增生改變，隨著時(shí)間的延長逐漸加重，以72 h左右*為明顯。結(jié)扎側(cè)腦半球呈程度不等的萎縮，經(jīng)針刺**，細(xì)胞變性壞死、凋亡及尼氏體脫失有減輕的趨勢，腦部形態(tài)結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)，腦萎縮減輕，重量較**前明顯增加，尤其是早期針刺介入的幼鼠，運(yùn)動(dòng)功能也會相應(yīng)改善。

4 對能量代謝的影響

腦組織能量代謝障礙是缺血缺氧性腦損傷病理生理過程中發(fā)生的首要環(huán)節(jié)。幼鼠腦缺血缺氧后ATP酶活性、ATP酶分解活性、ATP生成率均明顯下降，并伴隨血糖的下降，神經(jīng)細(xì)胞變性壞死；經(jīng)針刺的幼鼠ATP酶活性高于自然恢復(fù)的幼鼠，同時(shí)病理改變減輕，學(xué)習(xí)和記憶能力得到明顯提高，提示能量代謝變化可能是針刺**腦癱的重要機(jī)制之一。

5 對自由基代謝的影響

腦缺血缺氧后，自由基的產(chǎn)生與**失去平衡，可引發(fā)腦組織生成大量的自由基，如一氧化氮(NO)，它能與超氧陰離子O2⋅-結(jié)合，引起細(xì)胞膜、細(xì)胞器發(fā)生脂質(zhì)過氧化，加重腦損傷，而脂質(zhì)過氧化的主要降解物為丙二醛(MDA)。有實(shí)驗(yàn)顯示，接受針刺的幼鼠，腦組織中NO和MDA水平下降，較自然恢復(fù)的幼鼠明顯，同時(shí)腦水腫相應(yīng)減輕，提示針刺**可以有效抑制缺血缺氧后NO的產(chǎn)生，減輕NO和氧自由基對腦組織的損傷作用。

6 對細(xì)胞凋亡的影響

腦缺血缺氧后，幼鼠大腦皮層、海馬等腦部組織會發(fā)生細(xì)胞凋亡，是神經(jīng)細(xì)胞損傷的重要形式之一，有學(xué)者觀察到細(xì)胞凋亡在腦缺血缺氧后2~3 d達(dá)高峰。參與細(xì)胞凋亡調(diào)控的主要有Bcl-2家族和Caspase家族。Bcl-2家族的成員包括抑制細(xì)胞凋亡成員(如Bcl-2、Bcl-xL等)、促進(jìn)細(xì)胞凋亡成員(如Bax、Bak 等)和 BH3-only 死亡蛋白。近年來對于前兩類的研究較多，并已表明，Bcl-2和Bax的比例關(guān)系是決定對細(xì)胞凋亡抑制作用強(qiáng)弱的關(guān)鍵因素。研究顯示，腦缺血缺氧后Bax表達(dá)明顯增多，且比Bcl-2顯著，針刺可以提高Bcl-2的表達(dá)，同時(shí)降低Bax的表達(dá)，細(xì)胞凋亡數(shù)顯著減少，且干預(yù)越早越明顯，說明針刺能有效減少腦缺血缺氧后的細(xì)胞凋亡。

7 對突觸聯(lián)系的影響

神經(jīng)細(xì)胞間的突觸包括化學(xué)性突觸和電突觸，信息傳遞的媒介物分別是神經(jīng)遞質(zhì)和局部電流。突觸的結(jié)構(gòu)和信息傳遞效能影響著神經(jīng)系統(tǒng)的功能。

7.1 對突觸結(jié)構(gòu)的影響針刺**腦性癱瘓動(dòng)物懸尾實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

目前針刺研究主要集中在對微管相關(guān)蛋白-2(MAP-2)、突觸素p38等的影響。MAP-2 主要存在于**神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)細(xì)胞胞體、樹突和樹突棘等，參與構(gòu)成細(xì)胞骨架，調(diào)節(jié)突觸可塑性。劉波在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，給予腦缺血缺氧幼鼠頭穴叢刺，海馬CA1區(qū)MAP-2表達(dá)隨著時(shí)程增加，增高幅度明顯下降，結(jié)合環(huán)境刺激法后療效相應(yīng)地進(jìn)一步提高。實(shí)驗(yàn)中還觀察到學(xué)習(xí)記憶能力變化與MAP-2 表達(dá)變化相一致，表明海馬 CA1 區(qū) MAP-2 表達(dá)增加是頭穴叢刺或頭穴叢刺結(jié)合環(huán)境刺激法能有效促進(jìn)腦缺血缺氧幼鼠學(xué)習(xí)記憶能力改善的機(jī)制之一。突觸素p38廣泛存在于神經(jīng)細(xì)胞的突觸前囊泡中，參與神經(jīng)發(fā)育、分化、再生與修復(fù)。有研究顯示，幼鼠腦缺血后，突觸素表達(dá)增加，經(jīng)過頭穴叢刺后突觸素的表達(dá)更高，提示頭穴叢刺可增強(qiáng)突觸可塑性，研究還表明聯(lián)合環(huán)境刺激法后作用更大。

7.2 對神經(jīng)遞質(zhì)的影響

李曉捷等發(fā)現(xiàn)，幼年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物因缺血缺氧或高膽紅素致腦癱后腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量下降，針刺患側(cè)和督脈穴位時(shí)能明顯升高腦內(nèi)5-羥色胺(5-HT)含量、腦干去甲腎上腺素(NE)含量和基底核多巴胺(DA)。但也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，該法對腦內(nèi)和脊髓內(nèi)的NE含量均無明顯影響。這些說明針刺對腦癱模型腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量有一定的調(diào)控作用。但兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在明顯的差異，可能與腦癱模型不同、電針刺激方案不同、腦組織取材部位不完全相同等因素有關(guān)，有待深入研究。興奮性氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸(Glu)含量的升高是缺血缺氧性腦病發(fā)病過程中的重要環(huán)節(jié)，降低腦中 Glu 含量是關(guān)鍵。楊進(jìn)廉等研究發(fā)現(xiàn)，單純針刺患側(cè)穴位能明顯升高腦內(nèi)抑制性氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)含量；針刺患側(cè)穴位加上督脈穴位則能明顯降低腦內(nèi)和脊髓內(nèi)Glu 含量，升高脊髓內(nèi) GABA 含量，對其他神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響與針刺患側(cè)穴位效果相同或更強(qiáng)。這些研究結(jié)果提示針刺對腦和脊髓內(nèi)興奮性與抑制性氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)控具有廣泛性、復(fù)雜性，而同時(shí)選用患側(cè)和督脈具有協(xié)同作用。另外，乙酰膽堿(Ach)作為**膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)的重要遞質(zhì)之一，參與學(xué)習(xí)、記憶等重要的生理活動(dòng)。但由于目前尚無直接顯示Ach的組織化學(xué)方法，而膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)為細(xì)胞內(nèi)Ach合成的關(guān)鍵酶，一般以此代表膽堿能神經(jīng)細(xì)胞的功能狀態(tài)。李宛青等的研究發(fā)現(xiàn)，針刺**能有效促進(jìn)腦缺血缺氧幼鼠海馬結(jié)構(gòu)CA1區(qū)內(nèi)ChAT表達(dá)增多、增強(qiáng)，逐漸接近正常幼鼠，從而催化Ach合成增多，促進(jìn)功能恢復(fù)。

8 對神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)的影響

神經(jīng)營養(yǎng)因子已越來越多地用于腦損傷的研究與干預(yù)中，但大多限于成熟的腦組織，對在發(fā)育期腦損傷的應(yīng)用較少。有實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，幼鼠腦缺血缺氧后，抗氧化防御系統(tǒng)中的超氧化物岐化酶(SOD)的活力、谷光甘肽的含量均明顯下降。此時(shí)結(jié)扎側(cè)大腦半球的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)生長因子(NGF)表達(dá)明顯增多，逐漸達(dá)到高峰，但時(shí)程短，增加的水平有限，隨著生長發(fā)育其水平又逐漸降低，并維持在較低水平。針刺后能持續(xù)上調(diào)BDNF、NGF表達(dá)水平，在各時(shí)間點(diǎn)數(shù)量和強(qiáng)度上均顯著高于自然恢復(fù)的幼鼠，還進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)在刺激和維持NGF表達(dá)上，早期針刺效果更明顯。也有學(xué)者應(yīng)用宮內(nèi)感染致早產(chǎn)模型進(jìn)行研究，在BDNF表達(dá)變化顯示出與以上一致的結(jié)果。BDNF大量增加后，可以調(diào)節(jié)自由基代謝，增加SOD和谷光甘肽過氧化物酶等在神經(jīng)細(xì)胞中的活性，使自由基積聚減少，還可以對抗代謝性和興奮性氨基酸毒性損傷，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+的水平，穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)環(huán)境，對NO介導(dǎo)的谷氨酸神經(jīng)毒性也有抵抗作用，從而保護(hù)腦組織免受進(jìn)一步損傷。NGF、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)在調(diào)節(jié)抗氧化防御系統(tǒng)的作用方面有著與BDNF類似的作用。有實(shí)驗(yàn)顯示，腦缺血缺氧或?qū)m內(nèi)感染致腦損傷幼鼠的受損腦組織和鄰近區(qū)域bFGF表達(dá)增加，經(jīng)針刺**bFGF表達(dá)較自然恢復(fù)增加，并可延長強(qiáng)陽性表達(dá)，前肢功能恢復(fù)明顯，而且早期介入對于bFGF 的表達(dá)和前肢功能有著更為顯著的影響。說明針刺能改善神經(jīng)功能，調(diào)節(jié)bFGF表達(dá)可能是其機(jī)制之一。

9 其他

腦組織生長相關(guān)蛋白-43(growth associated protein, GAP-43)是神經(jīng)細(xì)胞軸突再生的分子標(biāo)志。黃雄昂等研究表明，針刺**促進(jìn)腦組織各部位(尤其是運(yùn)動(dòng)皮質(zhì))GAP-43的表達(dá)，并使其表達(dá)在一定時(shí)間內(nèi)維持在較高水平，從而有利于神經(jīng)組織再生和突觸重建。目前，GAP-43表達(dá)的調(diào)控機(jī)制尚不完全清楚。膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)是**神經(jīng)系統(tǒng)中星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性蛋白。王琴玉等應(yīng)用SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法檢測腦組織 GFAP 表達(dá)，發(fā)現(xiàn)經(jīng)針刺后GFAP表達(dá)增加，前肢功能相應(yīng)改善，提示針刺能促進(jìn)GFAP表達(dá)，可能是其**腦癱在細(xì)胞層面的重要機(jī)制之一。針刺**腦性癱瘓動(dòng)物懸尾實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

10 展望

有關(guān)針刺**腦癱作用機(jī)制的研究是多層次、多方面的，涉及腦血流量、病理形態(tài)學(xué)、能量代謝、自由基代謝、細(xì)胞凋亡、突觸聯(lián)系、神經(jīng)營養(yǎng)因子表達(dá)等，還有很多不為所知的機(jī)制需要進(jìn)一步的探索。目前的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)存在一些問題，如動(dòng)物模型、針刺方案不統(tǒng)一，選穴標(biāo)準(zhǔn)不同，針刺常常與電刺激結(jié)合，刺激量、強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)程不一等，導(dǎo)致很多實(shí)驗(yàn)結(jié)果之間無法進(jìn)行比較和利用。另外，有學(xué)者研究針刺的早期介入，但能早到什么程度，什么時(shí)候介入*適合，尚缺乏專門的實(shí)驗(yàn)及臨床研究，這些都是針刺**腦癱進(jìn)一步研究的切入點(diǎn)，應(yīng)加強(qiáng)研究，為深入的基礎(chǔ)研究和臨床療效的提高、**標(biāo)準(zhǔn)化的完善等提供依據(jù)和參考。